一：實驗前準備

1. 抗原：根據指定免疫類型從生物公司購買穩定的濃縮抗原

2. 抗凝劑的配制：用分析天平稱取3.8克檸檬酸三鈉，溶解于100毫升生理鹽水中，待溶解完全后即可使用。

3. 1%紅細胞懸液制作：去菜市場找殺雞的，去找他們用試管接新鮮雞血，試管中提前加入抗凝劑，加入的抗凝劑與你所接血液的比例大概為1:2，并迅速混勻，在離心機中以3000轉離心五分鐘，用吸管吸取上清液和紅細胞上層的白細胞薄膜，將沉淀的紅細胞加生理鹽水，慢慢混合均勻，不要弄碎了紅細胞，再在離心機中3000轉離心五分鐘，棄去上清，再加生理鹽水混勻，如此往復四到五次。最后一次離心后，去掉上清，管低即為紅細胞泥，用吸管吸取0.1毫升紅細胞泥，然后加入9.9毫升的生理鹽水就是1%的紅細胞懸液，現用現配不要長時間存放。

4. 被檢血清：鄉鎮送來的血液，離心取上清即為被檢驗血清，注意做標記，一管一標記，別弄混了。

5. 血清稀釋液：為滅菌生理鹽水，即高壓過的生理鹽水

二：實驗步驟

血凝（HA）實驗目的是測定抗原效價，即為了制作后面的四單位抗原

1.首先用微量移液器向96孔V型板的每一孔加生理鹽水25微升

2.用微量移液器吸取待測抗原（就是你買的抗原）的25微升于第一孔中并且擠壓六次混合，后吸出25微升至第二孔，依次倍比稀釋到第11孔，11孔中棄去25微升。這一過程最好一孔一換針頭。

3.用微量移液器再吸取1%紅細胞懸液一次加入各孔，每孔25微升

4.置于微量振蕩器上震蕩一分鐘

5.室溫靜置30分鐘觀察結果

6. 結果觀察：

將反應板傾斜成45度角，沉于底的紅細胞沿著傾斜面向下呈線狀流動者為沉淀，表明紅細胞被或者不完全被病毒所凝集：
如果孔底的紅細胞鋪平孔底，凝集成均勻薄層，說明被病毒凝集。
能使雞紅細胞完全凝集的抗原最高稀釋濃度，成為該抗原滴度紅細胞凝集效價，即這個比例稀釋的抗原就是一單位的抗原。比如第八孔紅細胞完全凝集，但第九孔紅細胞不凝集，那么這個抗原的效價為1:256。
也就是你買來的抗原稀釋256倍為一單位抗原，那么稀釋64倍就是四單位抗原。

四單位抗原校正：

1. 就是你依照上個實驗所作出的抗原效價來配置，比如假設上一步抗原效價為1:256，那么四單位抗原就是256除以4為64倍稀釋濃度的抗原，也就是你將買來的抗原稀釋64倍就是四單位的抗原，但是你買的抗原不同，雞紅細胞的本身原因，計算出的抗原效價不同，所以你必須先做抗原效價的計算。
2. 首先用微量移液器向反應板的第二孔至第六孔加生理鹽水25微升，第一孔不加。
3. 用微量移液器吸取四單位抗原25微升分別加入第一孔，第二孔，從第二孔開始擠壓六次混勻，后從第二孔吸出25微升至第3孔，依次倍比稀釋到第五孔，棄去25微升。
4. 用微量移液器再吸取1%紅細胞懸液依次加入1到6孔，每孔25微升。
5. 在微量振蕩器上震蕩一分鐘。
6. 室溫靜置30分鐘觀察結果
7. 如果照上面的結果來計算，如果第四孔發生百分之五十紅細胞沉淀而第五孔完全凝集，那么久說明四單位抗原制作準確。

血凝抑制實驗（HI）：每排只能查一份血清，步驟如下
1. 用微量移液器先加25微升生理鹽水在每個孔中
2. 用微量移液器吸取待檢測血清25微升于第一孔中，然后倍比稀釋至第11孔，（就是稀釋原則跟上面的一樣），最后11孔棄去25微升，最后第12孔不加血清，作為對照試驗。